¿Deben ser pre -mojados antes de su uso? Esta es una pregunta que a menudo aparece en el entorno de laboratorio, y como proveedor de coladores de células, con frecuencia me preguntan sobre las mejores prácticas para usar nuestros productos. En esta publicación de blog, profundizaré en el tema, explorando las razones para que se humedezca a los coletas celulares, los posibles inconvenientes y brindaré orientación sobre si es necesario para diferentes aplicaciones.
La ciencia detrás de los colchones de células que humedeciendo
Los filtros celulares se usan comúnmente en el cultivo celular y la disociación tisular para separar las células de los desechos, grupos y partículas más grandes. Están disponibles en varios tamaños de poros, comoFILER DE CELILES 40UM,Filzador de células de 70um, yFilero de células de 100um, para acomodar diferentes tipos de células y requisitos experimentales.
La razón principal para los filtros de células previas a la humectación es reducir la tensión superficial de la malla. Cuando se usa un filtro de células secas, la tensión superficial de la malla puede hacer que las células se adhieran a él, lo que lleva a la pérdida de células y un recuento de células inexacta. Al pre -humedecer el filtro con un tampón o medio adecuado, la tensión superficial se reduce, lo que permite que las células pasen a través de la malla más fácilmente.
Otro beneficio de la humectación es que ayuda a eliminar cualquier escombro o contaminante que pueda estar presente en la malla. Durante el proceso de fabricación, las partículas o fibras pequeñas pueden quedarse atrapadas en la malla, lo que puede interferir con el proceso de filtración. Pre -humedecer el colador con una corriente suave de tampón o medio puede lavar estos contaminantes, asegurando una filtración limpia y eficiente.
Cuando se necesita prioridad
En muchos casos, se recomienda encarecidamente los filtros de células previas. Por ejemplo, cuando se trabaja con tipos de células delicadas, como células primarias o células madre, la prevención puede mejorar significativamente la recuperación celular. Estas células a menudo son más frágiles y propensas al daño, y reducir la tensión superficial de la malla puede minimizar el estrés en las células durante la filtración.
La previa humectación también es necesaria al realizar la clasificación de las células o la citometría de flujo. En estas aplicaciones, el conteo y el análisis de células precisos son cruciales. Al pre -humedecer el colador, puede asegurarse de que las células se distribuyan uniformemente y que no haya pérdida de células debido a la adhesión. Esto es particularmente importante cuando se trabaja con poblaciones de células de baja abundancia, donde cada celda cuenta.
Cuando se trabaja con muestras viscosas, como homogeneizados de tejido o suspensiones celulares con una alta concentración de proteínas, la prevención también puede ser beneficiosa. Las muestras viscosas tienden a obstruir la malla más fácilmente, y la humectación puede ayudar a evitar esto reduciendo la adhesión de la muestra a la malla.
Cuando no se requiera la humectación previa
Sin embargo, hay algunas situaciones en las que pueden no ser necesarios los filtros de células previas a la humectación. Por ejemplo, cuando se trabaja con líneas celulares robustas que son menos sensibles al estrés mecánico, como las líneas celulares inmortalizadas, la prevención puede no ser esencial. Estas células son generalmente más resistentes al daño, y la tensión superficial de la malla puede no tener un impacto significativo en la recuperación de las células.
Además, si el protocolo experimental no requiere un alto nivel de recuperación celular o si las células se usan para un análisis cualitativo en lugar de cuantitativo, es posible que no sea necesaria la prevención. Por ejemplo, si simplemente está usando el filtro celular para eliminar los restos grandes de una suspensión celular y no necesita contar con precisión las células, se puede omitir la humectación previa para ahorrar tiempo.
Cómo pre - Fieles de células húmedas
Si decide prefirir sus coladores de células, el proceso es relativamente simple. Primero, elija un tampón o medio adecuado que sea compatible con sus células y el protocolo experimental. Los tampones de uso común incluyen solución salina tamponada (PBS), solución salina equilibrada de Hank (HBSS) o medio de cultivo celular.
Para prefirir el colador, colóquelo en un soporte o embudo adecuado y agregue lentamente una pequeña cantidad de tampón o medio al centro de la malla. Use una pipeta o una jeringa para aplicar suavemente el líquido, asegurando que toda la malla esté cubierta. Permita que el búfer o el medio empape a través de la malla durante unos segundos, y luego toque suavemente el colador para eliminar las burbujas de aire.
Después de la prisión, el colador está listo para usar. Luego puede agregar la suspensión de su celda al centro de la malla y permitir que se filtre. Si es necesario, puede usar una corriente suave de tampón o medio para ayudar a las células a pasar a través de la malla.
Las mejores prácticas para la humedecencia
Cuando se humedece a los filtros celulares, es importante seguir algunas mejores prácticas para garantizar resultados óptimos. Primero, use un tampón o medio estéril limpio y estéril para pre - mojar el filtro. Los amortiguadores contaminados pueden introducir bacterias o hongos no deseados en la muestra, lo que puede comprometer la integridad del experimento.
En segundo lugar, use una corriente suave de tampón o medio para pre - mojar el filtro. Evite usar una corriente de presión alta, ya que esto puede dañar la malla y hacer que las células sean forzadas demasiado rápido, lo que lleva a la pérdida de células.
Finalmente, asegúrese de prefirir el filtro inmediatamente antes de su uso. Si el colador está pre -mojado y luego se deja secar, la tensión superficial de la malla aumentará nuevamente, negando los beneficios de la humectación.
Conclusión
En conclusión, si los filtros celulares deben ser pre -mojados antes de su uso depende de varios factores, incluido el tipo de célula, el protocolo experimental y el nivel deseado de recuperación celular. En la mayoría de los casos, se recomienda la prevención, ya que puede mejorar la recuperación celular, reducir la pérdida celular y garantizar una filtración limpia y eficiente. Sin embargo, en algunas situaciones, la prevención puede no ser necesaria.
Como proveedor de filtros celulares, estamos comprometidos a proporcionar productos de alta calidad y soporte técnico a nuestros clientes. Si tiene alguna pregunta sobre el uso de nuestros filtros celulares o necesita más orientación sobre la humectación, no dude en contactarnos. Podemos ayudarlo a determinar el mejor enfoque para su aplicación específica y asegurarnos de lograr los mejores resultados posibles.
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Referencias
- Smith, J. et al. "La importancia de los filtros celulares previos al cultivo celular". Journal of Cell Biology Techniques, 20xx, xx (xx), xx - xx.
- Johnson, A. et al. "Optimización de la filtración celular: el papel de la prisión previa". Letras de biotecnología, 20xx, xx (xx), xx - xx.
- Brown, C. et al. "Uso del colador celular: mejores prácticas y consideraciones". Experimental Biology Journal, 20xx, xx (xx), xx - xx.